Práctica 16. Fosfatasa alcalina

Identificación de la actividad de la fosfatasa alcalina en leucocitos                             11-2-2020

Principio
Para la delimitación citoquimica de una leucemia mielocica cronica de otras enfermedades del tipo de formas mielo-proliferativas, especialmente frente a la mielofibrosis y la policetimia o, respectivamente, otros procesos inflamatorios o tumorosos, es adecuada la determinación de la actividad de la fosfatasa alcalina leucocitaria.

Materiales
--> Portaobjetos
--> Vaso de precipitado
--> Cubeta de Hellendahl
--> Vidrio de reloj
--> Lancetas



Reactivos
--> Reactivo 1 tris(hidroximetil)-aminometano
--> Reactivo 2 1-naftilo sal sódico
--> Reactivo 3 Variamin sel bleu B
--> Hemalumbre
Procedimiento
1.Para la solución de tinción mezclamos 100 ml de agua destilada con 4 cucharaditas de reactivo 1
2.Para la solución B mezclamos 15 ml de solución A con el contenido completo del reactivo 2
3.Para la solución de tinción mezclamos el reactivo 3 completo , 45 ml de solución A filtrada y la solución B
4.Preparamos un frotis sanguineo con sangre capilar
5.Introdujimos el porta en la solución de tinción durante 30 min
6.Pasado ese tiempo lo introdujimos en agua destilada 5 min
7.Lo introdujimos en la contratinción con Hemalumbre durante 5 min
8.Enjuagamos con agua del grifo 5 min
9.Secamos al aire y observamos al microscopio


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