Prácticas hematología

TBCI                                                                                                         24-2-2020 Principio del método La trasnferrina serica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitacion con carbonato magnesico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada y el hierro serico inicial nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual Significado clínico El hierro es el constituyente de un gran numero de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxigeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropenica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblacio

Determinación cuantitativa de hierro                                                            25-2-2020 Principio del método El hierro se disocia del complejo serico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ion ferroso mediante el ácido ascorbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada Significado clínico El hierro es el constituyente de un gran numero de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxigeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropenica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas. El diagnostico debe realizarse tenie

Tinción de reticulocitos                                                                                21-2-2020 Objetivo Determinar RET por un numero determinado de hematies.Calcular el numero de reticulocitos existentes por volumen de sangre. Materiales  --> Tubo --> Gradilla --> Lanceta --> Alcohol --> Portaobjetos -->Parafilm Reactivos --> Colorante de auzl de cresil brillante Muestra --> Sangre capilar Procedimiento 1.Colocamos en un tubo tres gotas de sangre capilar 2.Añadimos tres gotas de solucion de colorante 3.Tapamos el tubo con parafilm y mezclamos 4.Dejamos en reposo 20 min 5.Homogeneizamos de nuevo 6.Con una gota de la mezcla hicimos una extension 7.Dejamos secar al aire 8.Observamos al microscopio

Determinación cuantitativa de hemoglobina por el método de Dravkin                              17-2-2020 Fundamento  La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra ensayada Objetivo Determinar la concentración de hemoglobina en una muestra sanguínea Utilidad clínica La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatias, deshidratacion o estancia en lugares de gran altitud. El

Identificación de la actividad de la fosfatasa alcalina en leucocitos                             11-2-2020 Principio Para la delimitación citoquimica de una leucemia mielocica cronica de otras enfermedades del tipo de formas mielo-proliferativas, especialmente frente a la mielofibrosis y la policetimia o, respectivamente, otros procesos inflamatorios o tumorosos, es adecuada la determinación de la actividad de la fosfatasa alcalina leucocitaria. Materiales --> Portaobjetos --> Vaso de precipitado --> Cubeta de Hellendahl --> Vidrio de reloj --> Lancetas Reactivos --> Reactivo 1 tris(hidroximetil)-aminometano --> Reactivo 2 1-naftilo sal sódico --> Reactivo 3 Variamin sel bleu B --> Hemalumbre Procedimiento 1.Para la solución de tinción mezclamos 100 ml de agua destilada con 4 cucharaditas de reactivo 1 2.Para la solución B mezclamos 15 ml de solución A con el contenido completo del reactivo 2 3.Para la solución de tinción mezclamos el r

Detección de la reacción de la peroxidasa en leucocitos                                       11-2-2020 Principio La reacción de peroxisada, en particular la reacción citoquimicamente significativa de mieloperoxidasa, sirve de indicador para la presencia de elementos celulares mieloicos. El grado de madurez de los granulocitos en maduración puede ser estimado esencialmente según la intensidad de la reacción cromática pardo-negruzca Materiales --> Portaobjetos --> Vaso de precipitado --> Cubeta de Hellendahl --> Vidrio de reloj --> Lancetas Reactivos --> Reactivo 1 4-cloro-1-naftol --> Etanol --> Reactivo 2 tri(hidroximetil) amino-metano-HCl --> Reactivo 3 solución de peroxido de hidrogeno --> Contratinción de hemalumbre Muestra --> Frotis de sangre capilar Procedimiento 1.Preparamos un frotis sanguineo con sangre capilar 2.Preparamos la solución de tinción, disolviendo el contenido total del frasco del reactivo 1 en 1

Determinación cuantitativa del fibrinogeno                                                         10-2-2020 Principio del método El fibrinogeno en presencia de un exceso de trombina, se transforma en fibrina. El tiempo de formación del coagulo es inversamente proporcional a la concentración de fibrinogeno presente en la muestra de plasma. La determinación de fibrinogeno por el tiempo de coagulación de trombina, esta basada en el método descrito por Clauss. En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coagulo en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinogeno Significado clínico El fibrinogeno(factor I), proteína sintetizada en el hígado, es un componente de la sangre utilizado para formar el coagulo. Su determinación nos ayuda a evaluar las alteraciones en los mecanismos de coagulación. La concentración de fibrinogeno se incrementa en inflamaciones agudas y embarazo; por el contrario se observan val

Determinación cuantitativa del tiempo de protombina                                                 30-1-2020 Materiales --> Micropipetas y puntas --> Coagulometro --> Baño termostático Reactivos --> PT Muestra --> Plasma Procedimiento 1. Encendemos el coagulometro 2. Reconstruimos un el contenido de un vial con 4 ml de agua destilada, lo tapamos y agitamos hasta disolver el contenido 3.Calentamos el reactivo PT a 37º durante 7 minutos 4.Introdujimos en una cubeta del coagulometro la varilla de metal y depositamos 200 µl de PT y 100 µl de plasma 5.Esperamos a que el contador se pare y anotamos el resultado Resultado 12,9

Tiempo de sangría                                                                                    Materiales --> Lanceta --> Algodón -->Alcohol -->Papel de filtro -->Cronometro Procedimiento --> Se desinfecta la zona del brazo donde se va a realizar la punción --> Se coloca un tensiometro a 40 --> Se hace una punción con la lanceta --> Se espera 30 segundos y se coloca el papel de filtro alrededor para que absorba la sangre --> Se repite el mismo paso anterior antes que se detenga el sangrado Resultado Tiempo de sangría--> 2 min

Determinación cuantitativa del Tiempo de tromboplastina parcial activada                     21-2-2020 Materiales -->Tubos -->Pipetas automáticas --> Coagulómetro Reactivos --> R1 -->R2 --> Control Procedimiento 1.Atemperamos los reactivos 2.En un tubo depositamos 100µl de plasma y 100µl de R1 3.Mezclamos bien e incubamos 5 min a 37º 4.Pipeteamos 100µl de R2 y ponemos en marcha el coagulometro Cálculos 99,1/ 28,6 = 3,46

Coombs indirecto                                                                                               13-2-2019 Materiales -->Tubos -->Gradilla -->Pipetas pasteur -->Pipetas automáticas Reactivos  --> Antiglobulina humana -->Concentrado de hematies Muestra --> Sangre -->Suero Procedimiento 1.En un tubo depositamos 0,5ml de sangre y llenamos el resto con SF 2.Centrifugamos a 2500 rpm durante 1 min 3.Quitamos el sobrenadante, volvemos a llenar con SF y centrifugamos de nuevo 4.Repetimos los pasos anteriores una vez mas 5.Cogimos 0,1ml de concentrado de hematíes y lo depositamos en un tubo 6.Añadimos 1,9ml de SF 7.En otro tubo depositamos 4 gotas de concentrado de hematíes y 4 gotas de suero problema   8.Incubamos en el baño 20 min 9.Lavamos la mezcla con 1ml de SF 10.Centrifugamos 1 min a 2500 rpm 11.Al sedimento añadimos 4 gotas de AGH 12.Centrifugamos a 2500 rpm d

Coombs directo                                                                                   2-12-2019 Materiales --> Tubos -->Gradilla -->Tarjeta Reactivos --> Reactivos para coombs directo Muestra --> Sangre Procedimiento 1.Depositamos 1,5ml de sangre en un tubo 2.Llenamos el resto del tubo con NaCl 3.Centrifugamos a 2500 rpm durante 5min 4.Quitamos el sobrenadante y añadimos NaCl de nuevo 5.Volvemos a centrifugar 6.Quitamos el sobrenadante y añadimos NaCl de nuevo 7.Centrifugamos de nuevo 8.Depositamos 900µl de NaCl en un tubo y 50µl de sangre 9.En otro tubo depositamos 4 gotas de AGH y 4 gotas de sangre 10.Centrifugamos a 2500 rpm durante 1 min