Práctica 20.Hierro
Determinación cuantitativa de hierro 25-2-2020
Principio del método
El hierro se disocia del complejo serico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ion ferroso mediante el ácido ascorbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada
Significado clínico
El hierro es el constituyente de un gran numero de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxigeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropenica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas. El diagnostico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos de laboratorio
Materiales
--> Cubetas de espectrofotometro
--> Micropipetas y puntas
--> Tubos
--> Gradillas
Reactivos
--> R1 tampon
--> R2 reductor
--> R3 color
--> Iron cal
Procedimiento
1.Preparamos el RT disolviendo el contenido del tubo de R2 en el frasco de R1.
2.Encendemos el espectrofotometro
3.Pipeteamos en el tubo del blanco de reactivo 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de agua destilada
4.En el tubo de patrón depositamos 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de patron
5.En el tubo de blanco de muestra depositamos 1 ml de RT y 200 µl de muestra
6.En el tubo de muestra depositamos 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de muestra
7.Mezclamos e incubamos 10 min a temperatura ambiente
8.Medimos la absorbancia
Resultados
-Patrón--> 0,091
-Muestra --> 0,141
0,141/0,091 x 100 = 154,94
Principio del método
El hierro se disocia del complejo serico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ion ferroso mediante el ácido ascorbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada
Significado clínico
El hierro es el constituyente de un gran numero de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxigeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropenica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas. El diagnostico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos de laboratorio
Materiales
--> Cubetas de espectrofotometro
--> Micropipetas y puntas
--> Tubos
--> Gradillas
Reactivos
--> R1 tampon
--> R2 reductor
--> R3 color
--> Iron cal
Procedimiento
1.Preparamos el RT disolviendo el contenido del tubo de R2 en el frasco de R1.
2.Encendemos el espectrofotometro
3.Pipeteamos en el tubo del blanco de reactivo 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de agua destilada
4.En el tubo de patrón depositamos 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de patron
5.En el tubo de blanco de muestra depositamos 1 ml de RT y 200 µl de muestra
6.En el tubo de muestra depositamos 1 ml de RT, 1 gota de R3 y 200 µl de muestra
7.Mezclamos e incubamos 10 min a temperatura ambiente
8.Medimos la absorbancia
Resultados
-Patrón--> 0,091
-Muestra --> 0,141
0,141/0,091 x 100 = 154,94
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