Práctica 17. Peroxidasa
Detección de la reacción de la peroxidasa en leucocitos 11-2-2020
Principio
La reacción de peroxisada, en particular la reacción citoquimicamente significativa de mieloperoxidasa, sirve de indicador para la presencia de elementos celulares mieloicos. El grado de madurez de los granulocitos en maduración puede ser estimado esencialmente según la intensidad de la reacción cromática pardo-negruzca
Materiales
--> Portaobjetos
--> Vaso de precipitado
--> Cubeta de Hellendahl
--> Vidrio de reloj
--> Lancetas
Reactivos
--> Reactivo 1 4-cloro-1-naftol
--> Etanol
--> Reactivo 2 tri(hidroximetil) amino-metano-HCl
--> Reactivo 3 solución de peroxido de hidrogeno
--> Contratinción de hemalumbre
Muestra
--> Frotis de sangre capilar
Procedimiento
1.Preparamos un frotis sanguineo con sangre capilar
2.Preparamos la solución de tinción, disolviendo el contenido total del frasco del reactivo 1 en 15 ml de etanol,lo añadimos a una cubeta de Hellendahl, añadimos 45 ml de agua destilada , 10 gotas de reactivo 2 y 2 gotas del reactivo 3
3.Preparamos un frotis con sangre capilar
4.Introdujimos el porta en la solucion de tincion 10 min
5.Escurrimos el porta y lo introdujimos en agua destilada 10 s
6.Secamos al aire
7.Introdujimos el porta en la contratinción con hemalumbre durante 2 min
8.Enjuagamos con agua del grifo 3 min
9.Secamos al aire y observamos al microscopio
Principio
La reacción de peroxisada, en particular la reacción citoquimicamente significativa de mieloperoxidasa, sirve de indicador para la presencia de elementos celulares mieloicos. El grado de madurez de los granulocitos en maduración puede ser estimado esencialmente según la intensidad de la reacción cromática pardo-negruzca
Materiales
--> Portaobjetos
--> Vaso de precipitado
--> Cubeta de Hellendahl
--> Vidrio de reloj
--> Lancetas
Reactivos
--> Reactivo 1 4-cloro-1-naftol
--> Etanol
--> Reactivo 2 tri(hidroximetil) amino-metano-HCl
--> Reactivo 3 solución de peroxido de hidrogeno
--> Contratinción de hemalumbre
Muestra
--> Frotis de sangre capilar
Procedimiento
1.Preparamos un frotis sanguineo con sangre capilar
2.Preparamos la solución de tinción, disolviendo el contenido total del frasco del reactivo 1 en 15 ml de etanol,lo añadimos a una cubeta de Hellendahl, añadimos 45 ml de agua destilada , 10 gotas de reactivo 2 y 2 gotas del reactivo 3
3.Preparamos un frotis con sangre capilar
4.Introdujimos el porta en la solucion de tincion 10 min
5.Escurrimos el porta y lo introdujimos en agua destilada 10 s
6.Secamos al aire
7.Introdujimos el porta en la contratinción con hemalumbre durante 2 min
8.Enjuagamos con agua del grifo 3 min
9.Secamos al aire y observamos al microscopio
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