Práctica 18. Hemoglobina

Determinación cuantitativa de hemoglobina por el método de Dravkin                              17-2-2020

Fundamento 
La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra ensayada
Objetivo
Determinar la concentración de hemoglobina en una muestra sanguínea
Utilidad clínica
La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatias, deshidratacion o estancia en lugares de gran altitud. El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio
Materiales
--> Tubos
--> Gradilla
--> Micropipetas y puntas
--> Lanceta
--> Pipeta de 5 ml y auxiliar de pipeteo
--> Cubetas de fotometria
Reactivos
--> Hemoglobin 50 x
Muestra
--> Sangre capilar
Procedimiento
1.Preparamos el reactivo de Dravkin, mezclando 4,9 ml de agua destilada y 2 gotas de reactivo de trabajo
2.Encendemos el espectrofotometro
3.En el tubo para el blanco depositamos 5 ml de RT
4.En el tubo para el patrón depositamos 5 ml de RT y 20 µl de hemoglobin cal
5.En el tubo para la muestra depositamos 5 ml de RT y 20 µl de muestra
6.Incubamos 3 min a temperatura ambiente
7.Medimos su absorbancia
Resultados
-Patrón--> 0,242
-Muestra --> 0,213
0,213/0,242 x 15 = 13,2 g/dL