Práctica 2. Determinación cuantitativa de hemoglobina
7-10-19
-Objetivo
En esta práctica vamos a medir la hemoglobina en sangre venosa, a través de técnicas espectrofotometricas. La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina
-Material
-->Esprectrofotometro
-->Cubetas de 1cm de paso de luz
-->Probeta
-->Pipetas de 5ml y 10 ml y prepipetas
-->Gradilla
-->Tubos de ensayo
-->Micropipeta de 10 µl y puntas
-Reactivos
-->Hemoglobin 50x Drabkin, compuesto de ferricianuro de potasio, cianuro de potasio y dihidrogeno fosfato de potasio
-->Hemoglobin cal, que es el patrón de hemoglobina, de origen animal con concentración de 15 g/dL
-Procedimiento
1.Preparamos la gradilla con 2 tubos de ensayo
2.Con una pipeta cogemos 19,6ml de agua destilada y los depositamos en una probeta
3.Añadimos 8 gotas del reactivo y lo mezclamos
4.Cogemos 2,5ml de RT y lo depositamos en un tubo. Este sera el blanco
5.Cogemos otros 2,5ml de RT y se echan en otro tubo y añadimos 10µl de hemoglobin cal. Este sera el patrón
6.En otro tubo depositamos 2,5 ml de RT y añadimos 10 µl de muestra de sangre, se cierra con un tapón y se agita suavemente
7.Vertemos el contenido de cada tubo en cubetas
8.Ajustamos el espectrofotometro con el blanco
9.Introducimos el patrón
10.Introducimos la muestra
-Resultados
-Muestra --> 0,466
-Patrón --> 1,030
0,466/1,030 x 15= 6,78 g/dL
-Objetivo
En esta práctica vamos a medir la hemoglobina en sangre venosa, a través de técnicas espectrofotometricas. La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina
-Material
-->Esprectrofotometro
-->Cubetas de 1cm de paso de luz
-->Probeta
-->Pipetas de 5ml y 10 ml y prepipetas
-->Gradilla
-->Tubos de ensayo
-->Micropipeta de 10 µl y puntas
-Reactivos
-->Hemoglobin 50x Drabkin, compuesto de ferricianuro de potasio, cianuro de potasio y dihidrogeno fosfato de potasio
-->Hemoglobin cal, que es el patrón de hemoglobina, de origen animal con concentración de 15 g/dL
-Procedimiento
1.Preparamos la gradilla con 2 tubos de ensayo
2.Con una pipeta cogemos 19,6ml de agua destilada y los depositamos en una probeta
3.Añadimos 8 gotas del reactivo y lo mezclamos
4.Cogemos 2,5ml de RT y lo depositamos en un tubo. Este sera el blanco
5.Cogemos otros 2,5ml de RT y se echan en otro tubo y añadimos 10µl de hemoglobin cal. Este sera el patrón
6.En otro tubo depositamos 2,5 ml de RT y añadimos 10 µl de muestra de sangre, se cierra con un tapón y se agita suavemente
7.Vertemos el contenido de cada tubo en cubetas
8.Ajustamos el espectrofotometro con el blanco
9.Introducimos el patrón
10.Introducimos la muestra
-Resultados
-Muestra --> 0,466
-Patrón --> 1,030
0,466/1,030 x 15= 6,78 g/dL
Comentarios
Publicar un comentario